E Kit di Detekshon di ELISA di Antikurpa di Tipo di Circovirus di Porko ta pa determinashon di antikurpa spesífiko di PCV den suero di porko in vitro. E tèst ta wòrdu usá pa evaluá e vakunashon for di inmunisashon ku vakuna tipo -II di porko di porko.
Ehèmpel:serum
Materialnan Suministrá:
Proseduranan di Prueba i Interpretashon
STAP 1 Prosedura di Prueba
1.1 Preparashon di Solushon di Laba
Líkido di labamentu di konsentrashon di trabou: Promé ku uso, e solushon di labamentu mester wòrdu restorá na temperatura di kamber (20-25 grado ) i sagudí uniformemente pa hasié uniforme. Despues diluí 20 biaha e solushon di labamentu konsentrá ku awa purifiká (por ehèmpel, 5ml di solushon di labamentu konsentrá ta wòrdu agregá na 95ml di awa purifiká), meskla bon, i e líkido di labamentu diluí por wòrdu wardá na 2-8 grado pa 7 dia.
1.2 Preparashon di Muestra
A tuma sanger di bestia kompletu, a sentrifugá na 4000 rpm pa 10 minüt, i a rekohé e supernatante. Serum tambe por wòrdu koagulá naturalmente sin hemolisis.
Diluí e muestra di suero 1:25 (agregá 5ul di muestra di suero na 120ul di diluyente di muestra) i meskla kompletamente.
Nota: Kontrolnan negativo i positivo no mester wòrdu diluí.
1.3 Preparashon di konhugá di enzima
Diluí e konhugá di enzima 1:25 (agregá e konhugá di enzima 5ul na e diluyente di enzima di 120ul) i meskla kompletamente.
1.4 Prosedura di Prueba
1Tuma e etiketa di enzima Microplate (di akuerdo ku e kantidat di muestranan, por wòrdu desmontá i usa vários biaha), agregá 100ul di e serum diluí na e etiketa di enzima Microplate, pone dos pos kada un pa muestranan negativo i positivo, i agregá 100ul kada un pa kontrolnan negativo i positivo na e pos di reakshon respektivamente. Sagudí e muestra suavemente den e pos, usando e pelíkula di e plachi di seya pa tapa e plachi, i inkubá na 37 grado pa 30 minüt.
2Habri e pelíkula di e plachi di seyamentu, sagudí e solushon den e pos di e plachi, agregá 300μl di líkido di labamentu di konsentrashon di trabou na kada pos, i despues benta e líkido den e pos. Ripití e pasonan ariba menshoná 5 biaha, i finalmente bati seku riba un papel absorbente limpi.
3Agregá 100μl di Konhugá di Enzima na kada pos, tapa e plachi, i inkubá na 37 grado pa 45 minüt.
4Habri e pelíkula di e plachi di seyamentu, sakudí e solushon den e plachi pos, agregá 300μl di líkido di labamentu di konsentrashon di trabou na kada pos, i despues benta e líkido den e pos. Ripití e pasonan ariba menshoná 5 biaha, i finalmente bati seku riba un papel absorbente limpi.
⑤Agregá 100μl di solushon di substrato na kada pos, tapa e plachi i inkubá pa 10 minüt na 37 grado leu for di lus.
⑥Agregá 50μl di solushon di stòp na kada pos, i determiná e resultado denter di 5 minüt.
STAP 2 Interpretashon di Resultado
E balor di OD450 di kada pos a wòrdu lesá riba e lektor di mikroplaka di 96 pos.
2.1 Validashon
E balor promedio di OD450nm di kòntròl negativo tabata<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥5, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 Método di Kalkulashon
Pa kada muestra, kalkulá e S/P di e siguiente manera usando e balornan di muestra i kòntròl koregí:
S / P=(ODMUESTRA-ODNC) / (ODPC-ODNC)
2.3 Interpretashon di Resultado
Ora S/P<0.15, it is judged as negative.
Ora S/P Mas grandi ku òf igual na 0.25, e ta wòrdu husgá komo positivo.
Ora 0.15 Ménos ku òf igual na S/P<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
Tagnan di kalor: kit di detekshon di antikurpa elisa tipo di porko di porko-5, kit di detekshon di antikurpa elisa di porko tipo-5 suministradónan, fabrikantenan, fábrika
