Análisis Di Pasonan I Asuntunan Pa Agregá Muestranan di ELISA

Apr 09, 2021

Mester tene kuidou pa evitá hemolisis severo na promé lugá. Hemoglobina ta kontené grupo heme, ku tin e aktividat similar na peroksidonan. P’esei, den e determinashon di ELISA ku HRP komo e enzima marká, si e konsentrashon di hemoglobina den e ehemplar di serum ta haltu, ta fásil pa adsorbé na e fase sólido den e proseso di krio, pa asina por reakshoná ku e substrato di HRP agregá despues pa desaroyo di koló. Muestranan di suero separá pa medio di operashon aséptiko por wòrdu wardá na 2 ~ 8 grado pa un siman, i ta rekomendá pa warda nan den vries si bakteria ta enbolbí. E muestranan mester keda bou di -70 grado pa hopi tempu. Kolekshon di muestra i separashon di suero mester paga tinu pa evitá kontaminashon bakterial mas leu posibel, un kresementu bakterial, su sekreshon di algun enzima por ta antigeno, antikurpa i otro proteina efekto di deskomposishon; Di otro banda, algun enzima endógeno bakterial, manera e -galactosidase di Escherichia coli, nan mes lo kousa interferensia no spesífiko ku e ensayo marká ku e enzima korespondiente. Den kaso di turbididat òf flokulantenan kousa pa kontaminashon bakterial durante konservashon di ehemplar, mester tuma supernatante pa detekshon despues di presipitashon di sentrifugashon. E vries-deskongelamentu di e ehemplarnan di serum mester wòrdu evitá pa motibu di fayo di koriente. E forsa di kòrtamentu mekaniko generá dor di vries-deskongelamentu ripití di e ehemplar lo destruí proteina i otro molèkülnan den e ehemplar, loke ta resultá den resultadonan negativo falsu. Ademas, mester paga atenshon tambe na e meskla di ehemplarnan di freeze-thaw, i no mester hasi osilashonnan violento. E meskla mester wòrdu invertí repetidamente.


Den ELISA, generalmente tin tres paso pa agregá muestranan, esta, agregá e konhugá di enzima, agregá substrato. Despues di e smeltmentu di serum kongelá, e proteina ta wòrdu konsentrá lokalmente i distribuí desigualmente. E mester ta kompletamente mesklá, suavemente i evitá bula. E por wòrdu mesklá boca abou, i no oscilá fuertemente riba e mixer. E preparashon di muestranan di plasma ta rekerí yudansa di antikoagulantenan, miéntras ku e muestranan di suero por wòrdu optené solamente despues di e koagulashon natural di suero i e kontrakshon di koágulonan di sanger. Diluyente tambe por wòrdu agregá na e buraku di e plachi, i despues e ehemplar di suero ta wòrdu agregá na dje, i despues ta sagudí riba un mikro osiladó pa 1 minüt pa garantisá meskla. En general, muestranan di serum midi denter di 5 dia por wòrdu wardá na 4 grado C, i esnan midi mas ku un siman mester wòrdu wardá den ijs friu. Un rango amplio di muestranan por wòrdu usá pa determinashon di ELISA. Fluidonan di kurpa (manera suero), sekreshonnan (saliva) i ekskretonan (manera orina, heces) tur por wòrdu usá komo muestranan pa determiná algun komponente di antikurpa òf antigeno. E parti di e kit di ELISA ku no ta nesesario den e tèst aki mester wòrdu wardá den frishidèr na tempu.